Título | DIVERSIDADE TAXONÔMICA E PRODUÇÃO DE ANTIMICROBIANOS PRODUZIDOS POR FUNGOS ISOLADOS DE AMOSTRAS DE ÁGUA DE UM IGARAPÉ POLUÍDO DA CIDADE DE MANAUS-AMAZONAS |
Data da Defesa | 28/02/2023 |
Download | Em sigilo |
Banca
Examinador | Instituição | Aprovado | Tipo |
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Dra. Antônia Queiroz Lima de Souza | UFAM | Sim | Membro | Dra. Perola de Oliveira Magalhães Dias Batista | UNB | Sim | Membro | Dr. Hector Henrique Ferreira Koolen | UEA | Sim | Membro | Dr. João Paulo Alves Silva | USP | Sim | Membro | Dr. João Vicente Braga de Souza | INPA | Sim | Presidente |
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Palavras-Chaves | Escherichia coli; fungos; antimicrobianos; ambientes aquáticos. |
Resumo | Escherichia coli é um bacilo Gram-negativo que pode causar graves infecções como as do trato
urinário e/ou sistêmicas. O uso inadequado de antibióticos conferiu a algumas estirpes
adaptações que lhe conferiram genes de resistência a maioria dos antibióticos convencionais.
Recentemente, ambientes aquáticos poluídos vêm sendo investigados na busca de
microorganismos com potencial antimicrobiano. Essa abordagem justifica-se na hipótese que
de ambientes poluídos causam pressão biológica que pode resultar em fungos produtores de
metabólitos secundários mais potentes com funções antimicrobianas. O objetivo do presente
trabalho foi investigar a diversidade e a produção de antimicrobianos por fungos de um igarapé
poluído da cidade de Manaus/Amazonas. Assim, foram coletadas cinco amostras de água em
três pontos no igarapé do Mindú (Manaus-AM) divididos em nascente, ponto central e foz. A
partir do isolamento, foram realizados bioprocessos para a seleção dos melhores produtores de
antimicrobianos. Os fungos foram cultivados em meio líquido e em seguida foram obtidos
extratos utilizando os solventes hexano e acetato de etila que foram avaliados quanto a inibição
do crescimento de E. coli ATCC 25922 e E. coli produtora de enzima β-lactamases de espectro
estendido (ESBL) em ensaio de difusão em ágar. Posteriormente, os melhores produtores de
antimicrobianos foram identificados por meio dos aspectos micromorfológico,
macromorfológico e sequenciamento do DNA ITS e NL. Os extratos dos melhores isolados
foram avaliados quanto a sua concentração inibitória mínima (CIM) e submetidos a
metodologias cromatográficas e espectrométricas para determinação química das substâncias
com atividade antibacteriana. No total, cinco fungos Annulohypoxylon stygium (ID WL1B5),
Colletotrichum fructicola (ID WL3B9), Clonostachys rosea (ID WL5B18), Clonostachys rosea
(ID WL8B28) e Trichoderma harzianum (ID WL9B49) mostraram potencial bioativa frente as
bactérias testadas. O isolado Annulohypoxylon stygium (ID WL1B5) obteve os melhores
resultados de atividade antimicrobiana. A partir das análises de caracterização química, inferese que a substância 3,4,5-trihidroxi-1-tetralona pode estar associada a atividade antimicrobiana |
Abstract | Escherichia coli is a Gram-negative bacillus that can cause serious infections such as urinary
tract or systemic infections. The inappropriate use of antibiotics has given some strains
adaptations that have given resistance genes to most conventional antibiotics. Recently,
polluted aquatic environments have been investigated in the search for microorganisms with
antimicrobial potential. This approach is justified by the hypothesis that polluted environments
cause biological pressure that can result in fungi that produce secondary but potent metabolites
with antimicrobial functions. The aim of this study was to investigate the diversity and
production of antimicrobials by fungi in a polluted stream in the city of Manaus/Amazonas.
Thus, water samples were collected at three points on the Mindú creek (Manaus-AM) divided
into headwater, central point and estuary. Based on the isolation, antimicrobial-producing fungi
were selected, which were later identified through micromorphological and
macromorphological aspects and ITS DNA sequencing. In order to select the best antimicrobial
producers, the fungi were developed in liquid medium and then extracts were obtained using
the solvents hexane and ethyl acetate, which were evaluated for inhibition of the growth of E.
coli ATCC 25922 and E. coli ESBL producer in agar diffusion assay. The extracts of the best
isolates were evaluated for their minimum inhibitory concentration (MIC) and subjected to
chromatographic and spectrometric methods for the chemical determination of substances with
antibacterial activity. In total, five fungi Annulohypoxylon stygium (ID WL1B5),
Colletotrichum fructicola (ID WL3B9), Clonostachys rosea (ID WL5B18), Clonostachys rosea
(ID WL8B28) and Trichoderma harzianum (ID WL9B49) showed bioactive potential against
the tested bacteria. The isolated Annulohypoxylon stygium (ID WL1B5) obtained the best
antimicrobial activity results. From the chemical characterization analyses, it is inferred that
the substance 3,4,5-trihydroxy-1-tetralone can be associated with antimicrobial activity. |