Corpo Discente - Egressos

Jadson Pinheiro Santos
TítuloVIABILIDADE DO USO DE SÊMEN CRIOPRESERVADO DE TAMBAQUI Colossoma macropomum (Cuvier, 1816) (CHARACIFORMES: SERRASALMIDAE) EM ENSAIOS ECOTOXICOLÓGICOS
Data da Defesa06/06/2023
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Banca

ExaminadorInstituiçãoAprovadoTipo
Dra. Alana Lislea de SousaUEMASimMembro
Dra. Ligia TchaikaUEMASimMembro
Dra. Raimunda Nonata Fortes Carvalho NetaUEMASimPresidente
Dr. Laércio dos Anjos BenjaminUFVSimMembro
Dr. Ricardo Luvizotto SantosUFMASimMembro
Palavras-ChavesAgrotóxicos; Biomonitoramento; Ecotoxicologia; Peixe amazônico; Qualidade espermática; Xenobióticos.
ResumoOs peixes constituem o grupo de vertebrados predominante em ambientes aquáticos e são afetados diretamente pela presença de contaminantes nos corpos hídricos. Ensaios ecotoxicológicos já foram descritos para refletir efeitos nocivos da contaminação de ambientes aquáticos, principalmente com resíduos de agrotóxicos, no entanto, existe uma lacuna na ciência sobre informações de protocolos de uso do sêmen de peixes para ensaios ectoxicológicos. No presente trabalho, objetivou-se analisar a viabilidade do uso de sêmen criopreservado de tambaqui Colossoma macropomum em ensaios ecotoxicológicos como estratégia de monitoramento da qualidade de ambientes aquáticos. A pesquisa foi realizada com uma busca sistematizada por artigos científicos no período de 2000 a 2019 utilizando-se da base de dados Web of Science, a partir dos descritores “fish reproduction”, “contamination”, “toxicology”, “ecotoxicity” e “biomonitoring”, combinados com uso dos operadores boleanos “and” e “or”. Após a busca, foi feita uma primeira triagem a partir da análise de conteúdo dos títulos e do resumo. Em seguida, foi feita a leitura integral de 98 artigos, sendo selecionados 40. Numa segunda etapa, foram feitos testes ecotoxicológicos com uso de amostras seminais de machos sexualmente maduros de tambaqui provenientes de uma piscicultura local em testes ecotoxicológicos com amostras in natura e criopreservadas. O sêmen foi coletado oito horas pós-indução hormonal em tubos de vidro. Após avaliação inicial de inexistência de ativação prévia, o experimento foi feito em esquema fatorial analisando dois agrotóxicos utilizados em sistemas agrícolas (glifosato e fenitrotiona). Para cada agrotóxico, foram testadas cinco concentrações (6, 12, 24, 120 e 240 mg/L), com posterior análise da motilidade espermática nos tempos 0, 30 e 60 segundos pós-ativação. Como controle (negativo), foi utilizada a ativação com solução de NaCl a 0,9% e análise da motilidade nos mesmos tempos descritos para os agrotóxicos. Por último, o trabalho apresenta artigo com a análise do biomonitoramento pesqueiro no Brasil e a observância dos Objetivos de Desenvolvimento Sustentável. Os resultados da busca sistematizada indicaram 25 espécies de peixes como bioindicadoras, com predominância do Danio rerio (18%). Os inseticidas estiveram presentes em 78% dos estudos, principalmente o endosulfan (35%) e a cipermetrina (13%). Distúrbios endócrinos reprodutivos foram as vias de ação mais relatadas (57,5%). Nos testes ecotoxicológicos, os resultados indicaram que as amostras de sêmen in natura exibiram motilidade inicial de 89,2±4,9% e tempo de duração médio de 100 segundos (até 10% de motilidade espermática). A redução da motilidade espermática ocorreu de forma significativa (p<0,05) após 30 segundos tanto para o glifosato quanto para fenitrotiona em todas as concentrações, exceto na de 240 mg/L que não apresentou ativação para ambos os agrotóxicos. Para o sêmen criopreservado, houve significativa redução da motilidade espermática logo após a exposição as soluções com resíduos de glifosato nas concentrações testadas em relação ao controle, sem ter havido, no entanto, diferenças significativas (p>0,05) entre as concentrações dos resíduos de glifosato. Ficaram evidentes os efeitos causados por agrotóxicos na reprodução de teleósteos de água doce, com indicação de sensibilidade das células espermáticas aos agrotóxicos, demonstrando a possibilidade de uso de sêmen criopreservado de tambaqui em testes ecotoxicológicos.
AbstractFish are the predominant group of vertebrates in aquatic environments and are invited directly by the presence of contaminants in water bodies. Ecotoxicological tests have already been felt to reflect the negative effects of contamination of aquatic environments, mainly with pesticide residues; however, there is a gap in science about information on protocols for the use of fish semen for ectoxicological tests. In the present study, the objective was to analyze the feasibility of using cryopreserved semen of tambaqui Colossoma macropomum in ecotoxicological assays as a strategy for monitoring the quality of aquatic environments. The research was carried out with a systematic search for scientific articles in the period from 2000 to 2019 using the “Web of Science” database, using the descriptors “fish reproduction”, “contamination”, “toxicology”, “ecotoxicity” and “biomonitoring”, combined with the use of boolean operators “AND” and “OR”. After the search, a first screening was performed based on the content analysis of titles and abstracts. Then, 98 articles were read in full, and 40 were selected. In a second step, ecotoxicological tests were carried out using seminal samples of sexually mature tambaqui males from a local fish farm in ecotoxicological tests with in natura and cryopreserved samples. Semen was collected eight hours after hormone induction into glass tubes. After initial assessment of the lack of prior activation, the experiment was carried out in a factorial scheme, analyzing two pesticides used in agricultural systems (glyphosate and fenitrothion). For each pesticide, five concentrations (6, 12, 48, 120 and 240 mg/L) were tested, with analysis of motility at times 0, 30 and 60 seconds after activation. As a control (negative), we used activation with a 0.9% NaCl solution and motility analysis at the same times described for pesticides. Finally, the research was carried out with the analysis of biomonitoring in Brazil and the observance of the Sustainable Development Goals, The results of the systematic bibliographic research indicated 25 species of fish, with a predominance of Danio rerio (17.5%). Insecticides were present in 78% of the studies, mainly endosulfan (35%) and cypermethrin (13%). Reproductive endocrine disorders were the most reported pathways of action (57.5%). In ecotoxicological tests, the results indicate that the in natura samples exhibited an initial motility of 89.2 ± 4.9%, and a mean duration of 100 seconds (up to 10% of sperm motility). The reduction in sperm motility occurred significantly (p<0.05) after 30 seconds for both glyphosate and fenitrothione in all concentrations, except for the 240 mg/L that did not show activation for both pesticides. For cryopreserved semen, there was a significant reduction in sperm motility soon after exposure to solutions with glyphosate residues at the concentrations tested in relation to the control, without, however, significant differences (p>0.05) between residue concentrations of glyphosate. The effects caused by pesticides on the reproduction of freshwater teleosts were evident, with indication of sensitivity of sperm cells to pesticides, demonstrating the possibility of using cryopreserved tambaqui semen in ecotoxicological tests.
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