Título | VIABILIDADE DO USO DE SÊMEN CRIOPRESERVADO DE TAMBAQUI Colossoma macropomum (Cuvier, 1816) (CHARACIFORMES: SERRASALMIDAE) EM ENSAIOS ECOTOXICOLÓGICOS |
Data da Defesa | 06/06/2023 |
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Banca
Examinador | Instituição | Aprovado | Tipo |
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Dra. Alana Lislea de Sousa | UEMA | Sim | Membro | Dra. Ligia Tchaika | UEMA | Sim | Membro | Dra. Raimunda Nonata Fortes Carvalho Neta | UEMA | Sim | Presidente | Dr. Laércio dos Anjos Benjamin | UFV | Sim | Membro | Dr. Ricardo Luvizotto Santos | UFMA | Sim | Membro |
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Palavras-Chaves | Agrotóxicos; Biomonitoramento; Ecotoxicologia; Peixe amazônico; Qualidade espermática; Xenobióticos. |
Resumo | Os peixes constituem o grupo de vertebrados predominante em ambientes aquáticos e são
afetados diretamente pela presença de contaminantes nos corpos hídricos. Ensaios
ecotoxicológicos já foram descritos para refletir efeitos nocivos da contaminação de
ambientes aquáticos, principalmente com resíduos de agrotóxicos, no entanto, existe uma
lacuna na ciência sobre informações de protocolos de uso do sêmen de peixes para ensaios
ectoxicológicos. No presente trabalho, objetivou-se analisar a viabilidade do uso de sêmen
criopreservado de tambaqui Colossoma macropomum em ensaios ecotoxicológicos como
estratégia de monitoramento da qualidade de ambientes aquáticos. A pesquisa foi realizada
com uma busca sistematizada por artigos científicos no período de 2000 a 2019 utilizando-se
da base de dados Web of Science, a partir dos descritores “fish reproduction”,
“contamination”, “toxicology”, “ecotoxicity” e “biomonitoring”, combinados com uso dos
operadores boleanos “and” e “or”. Após a busca, foi feita uma primeira triagem a partir da
análise de conteúdo dos títulos e do resumo. Em seguida, foi feita a leitura integral de 98
artigos, sendo selecionados 40. Numa segunda etapa, foram feitos testes ecotoxicológicos
com uso de amostras seminais de machos sexualmente maduros de tambaqui provenientes de
uma piscicultura local em testes ecotoxicológicos com amostras in natura e criopreservadas.
O sêmen foi coletado oito horas pós-indução hormonal em tubos de vidro. Após avaliação
inicial de inexistência de ativação prévia, o experimento foi feito em esquema fatorial
analisando dois agrotóxicos utilizados em sistemas agrícolas (glifosato e fenitrotiona). Para
cada agrotóxico, foram testadas cinco concentrações (6, 12, 24, 120 e 240 mg/L), com
posterior análise da motilidade espermática nos tempos 0, 30 e 60 segundos pós-ativação.
Como controle (negativo), foi utilizada a ativação com solução de NaCl a 0,9% e análise da
motilidade nos mesmos tempos descritos para os agrotóxicos. Por último, o trabalho apresenta
artigo com a análise do biomonitoramento pesqueiro no Brasil e a observância dos Objetivos
de Desenvolvimento Sustentável. Os resultados da busca sistematizada indicaram 25 espécies
de peixes como bioindicadoras, com predominância do Danio rerio (18%). Os inseticidas
estiveram presentes em 78% dos estudos, principalmente o endosulfan (35%) e a cipermetrina
(13%). Distúrbios endócrinos reprodutivos foram as vias de ação mais relatadas (57,5%). Nos
testes ecotoxicológicos, os resultados indicaram que as amostras de sêmen in natura exibiram
motilidade inicial de 89,2±4,9% e tempo de duração médio de 100 segundos (até 10% de
motilidade espermática). A redução da motilidade espermática ocorreu de forma significativa
(p<0,05) após 30 segundos tanto para o glifosato quanto para fenitrotiona em todas as
concentrações, exceto na de 240 mg/L que não apresentou ativação para ambos os
agrotóxicos. Para o sêmen criopreservado, houve significativa redução da motilidade
espermática logo após a exposição as soluções com resíduos de glifosato nas concentrações
testadas em relação ao controle, sem ter havido, no entanto, diferenças significativas (p>0,05)
entre as concentrações dos resíduos de glifosato. Ficaram evidentes os efeitos causados por
agrotóxicos na reprodução de teleósteos de água doce, com indicação de sensibilidade das
células espermáticas aos agrotóxicos, demonstrando a possibilidade de uso de sêmen
criopreservado de tambaqui em testes ecotoxicológicos. |
Abstract | Fish are the predominant group of vertebrates in aquatic environments and are invited directly
by the presence of contaminants in water bodies. Ecotoxicological tests have already been felt
to reflect the negative effects of contamination of aquatic environments, mainly with pesticide
residues; however, there is a gap in science about information on protocols for the use of fish
semen for ectoxicological tests. In the present study, the objective was to analyze the
feasibility of using cryopreserved semen of tambaqui Colossoma macropomum in
ecotoxicological assays as a strategy for monitoring the quality of aquatic environments. The
research was carried out with a systematic search for scientific articles in the period from
2000 to 2019 using the “Web of Science” database, using the descriptors “fish reproduction”,
“contamination”, “toxicology”, “ecotoxicity” and “biomonitoring”, combined with the use of
boolean operators “AND” and “OR”. After the search, a first screening was performed based
on the content analysis of titles and abstracts. Then, 98 articles were read in full, and 40 were
selected. In a second step, ecotoxicological tests were carried out using seminal samples of
sexually mature tambaqui males from a local fish farm in ecotoxicological tests with in natura
and cryopreserved samples. Semen was collected eight hours after hormone induction into
glass tubes. After initial assessment of the lack of prior activation, the experiment was carried
out in a factorial scheme, analyzing two pesticides used in agricultural systems (glyphosate
and fenitrothion). For each pesticide, five concentrations (6, 12, 48, 120 and 240 mg/L) were
tested, with analysis of motility at times 0, 30 and 60 seconds after activation. As a control
(negative), we used activation with a 0.9% NaCl solution and motility analysis at the same
times described for pesticides. Finally, the research was carried out with the analysis of
biomonitoring in Brazil and the observance of the Sustainable Development Goals, The
results of the systematic bibliographic research indicated 25 species of fish, with a
predominance of Danio rerio (17.5%). Insecticides were present in 78% of the studies, mainly
endosulfan (35%) and cypermethrin (13%). Reproductive endocrine disorders were the most
reported pathways of action (57.5%). In ecotoxicological tests, the results indicate that the in
natura samples exhibited an initial motility of 89.2 ± 4.9%, and a mean duration of 100 seconds (up to 10% of sperm motility). The reduction in sperm motility occurred significantly
(p<0.05) after 30 seconds for both glyphosate and fenitrothione in all concentrations, except
for the 240 mg/L that did not show activation for both pesticides. For cryopreserved semen,
there was a significant reduction in sperm motility soon after exposure to solutions with
glyphosate residues at the concentrations tested in relation to the control, without, however,
significant differences (p>0.05) between residue concentrations of glyphosate. The effects
caused by pesticides on the reproduction of freshwater teleosts were evident, with indication
of sensitivity of sperm cells to pesticides, demonstrating the possibility of using
cryopreserved tambaqui semen in ecotoxicological tests.
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